來(lái)源:SIGMA-ALDRICH公司/PharmaGMP,藥物分析之家本期的分享來(lái)自于SIGMA-ALDRICH公司的一本指南,HPLC Troubleshooting Guide

柱溫的影響對(duì)于部分檢測(cè)器,尤其是示差折光檢測(cè)器或者高靈敏度的紫外檢測(cè)器,對(duì)于柱溫模塊的影響,通常導(dǎo)致的是基線有規(guī)律的上升和下降;處理方法中有一條,在進(jìn)入檢測(cè)器前加上換熱器,不過(guò)換熱器是個(gè)什么東東,貌似并沒有用過(guò)。2. 流動(dòng)相不均勻 這個(gè)原因?qū)е碌幕€漂移通常是不規(guī)則的,與前一條柱溫的影響不同,流動(dòng)相的污染或者不均勻會(huì)導(dǎo)致基線的升高,采用HPLC級(jí)別的溶劑或者高純度的鹽或添加劑,并對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行脫氣可以解決流動(dòng)相不均勻?qū)е碌幕€漂移問(wèn)題。檢測(cè)器流通池的污染之前好像提到過(guò),今天重點(diǎn)說(shuō)一下解決的方法,采用極性強(qiáng)的溶劑(比如甲醇)對(duì)檢測(cè)池進(jìn)行沖洗,如有必要,用1N濃度的稀硝酸進(jìn)行沖洗,特別需要提示的是,采用稀硝酸進(jìn)行沖洗的時(shí)候不要接PEEK接頭,也不要采用鹽酸進(jìn)行沖洗;4. 檢測(cè)器出口管線擰得過(guò)緊,這會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)池的背壓太高,導(dǎo)致檢測(cè)池可能產(chǎn)生裂紋,從而導(dǎo)致基線的升高,如果檢測(cè)池真的損壞了,只能考慮對(duì)檢測(cè)池進(jìn)行更換了;5. 流動(dòng)相混合的問(wèn)題或流速的變化流動(dòng)相混合的問(wèn)題及流速問(wèn)題是在這幾天的分享中常見的問(wèn)題了,解決方法之前也提到過(guò),在遇到問(wèn)題的時(shí)候需要特別注意輸液泵的工作狀態(tài);6. 色譜柱平衡不充分,尤其是更換流動(dòng)相的時(shí)候對(duì)此指南給出的解決方法是采用中極性強(qiáng)度的溶液,在分析前對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗,沖洗的體積通常需要達(dá)到10-20倍的色譜柱體積7. 流動(dòng)相的污染,尤其是沒有采取高純度的試劑8. 樣品物質(zhì)的強(qiáng)保留屬性,導(dǎo)致峰的嚴(yán)重展寬,從而表現(xiàn)為基線的抬升注意這里的表述,表現(xiàn)為基線的抬升,實(shí)際上是被測(cè)組份的強(qiáng)保留,這里的基線漂移實(shí)際上是檢測(cè)組分的緩慢洗脫。9. 檢測(cè)器設(shè)置錯(cuò)誤,這種錯(cuò)誤應(yīng)該不常見,有興趣有朋友可以自行查閱原文。