TLC上的位置,除了分子的極性外,也得考慮TLC的性質,是硅膠、氧化鋁或樹脂，因為不同的TLC與分子的作用是不同的，硅膠上有很多羥基，你的物質是通過與硅膠形成氫鍵-洗脫-再形成氫鍵這樣在板上移動的，這時極性大的物質與硅膠作用強，體現在TLC上就是位置靠下。但對某些樹脂，是通過疏水作用與你的分子作用的，極性大的樹脂對其吸附作用反而小，體現在TLC上是位置靠上。 另外，還得考慮一個展開劑的性質，如果是兩個物質極性相差較小，不同的展開劑（極性及其它性質），即使在同一種TLC上，展開后的位置也會有變化。我曾經遇到過這樣的例子，兩個分子用硅膠板在不同的展開條件下，展開后其前后位置竟顛倒了。如果分子的極性相差很大，比如一個是鹽，一個是中性分子，那只要在同一種TLC上，比如硅膠，展開后總是鹽在后（一般在原點不動），中性分子在前。但如果極性相差不大，那各種影響因素都得考慮。 展開劑的極性，在硅膠板上，極性大的展開劑會把同一種物質推得更靠前。甲醇的極性比乙腈大，但前面已說過，展開過程非常復雜，這并不是唯一的考慮。 通常情況是這樣，但也有例外，如說到：‘比如一個是鹽，一個是中性分子，那只要在同一種TLC上，比如硅膠，展開后總是鹽在后（一般在原點不動）’，我做過個雜環芳胺，其鹽酸鹽和游離胺在同一種TLC上的Rf值是一樣的，可能是特例，基本同意。 TLC時大家總喜歡談極性的問題,我從不考慮誰的極性大誰的極性小,我只看誰跑在上面誰跑在下面!過柱子時Rf值大的先出來,Rf值小的后出來!管它極性大小! 一般是對同一個樣品，展開劑的極性越大，被展開的物質爬的越快。 硅膠板一般屬于正相系統，固定相極性大，展開劑極性小，所以被分離物質在傳統的硅膠TLC中，跑的快的是極性較小的，跑的慢的是極性較大的 不管是TLC還是HPLC，物質跑的快慢都與物質本身及流動相的極性相關，物質的極性與流動相的極性越接近，越跑的快。 兩者極性相近結構形似，選展開劑時這兩個物質總是離得很近，則要減少極性，爬到頭后，吹干，繼續爬板。重復幾次就能分開. 大家談談平時TCL時的經驗，雖說爬板分離是很普通的一件事，卻有很多注意的地方： 點樣時濃度要調節適當，點樣時樣品點不要過大，展開劑的液面不要沒過點的樣； 點樣大小，濃度要把握好，有是需要的話，可以點2個點； 點樣的高度，一般選擇1cm左右； 點板時要選擇合適的展開劑，RF選擇在0.4-0.5左右（個人意見），如果是兩個點或多個點時，RF2-RF1>0.1左右； 展開劑最好是現配，不要擱置太久。
